Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TCL-1A Double Nickase Plasmid (h): sc-402028-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das TCL-1A Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- TCL-1A Double-Nickase-Plasmid (h) und TCL-1A Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf TCL1A abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: TCL-1A: sc-393436
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
TCL-1A Double Nickase Plasmid (h) | sc-402028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TCL-1A Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TCL1A kodiert das onkogene Adapterprotein TCL-1A, einen zentralen Modulator der AKT/PKB-Signalübertragung, der die Ausgangsleistung des PI3K–AKT-Signalwegs verstärkt und Zellwachstum, Überleben sowie metabolische Programme unterstützt. TCL-1A wird während der Entwicklung besonders stark in lymphatischen Zelllinien exprimiert und kann die Reifung von B- und T-Zellen beeinflussen, indem es Schwellenwerte der Signaltransduktion feinjustiert. Eine fehlregulierte TCL1A-Expression wurde mit lymphoproliferativen Phänotypen in Verbindung gebracht und wird häufig im Kontext hämatologischer Malignome untersucht, bei denen aberrante AKT-Aktivierung und eine veränderte Kontrolle der Apoptose verbreitet sind. Als Signalkofaktor bietet TCL-1A einen mechanistischen Ansatzpunkt, um zu untersuchen, wie eine Verstärkung von Signalwegen Transkriptionszustände, Stressantworten und transformationsassoziierte zelluläre Verhaltensweisen beeinflusst.
TCL-1A Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des TCL1A-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von TCL1A abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die TCL1A-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit TCL1A-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.