TBX3 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400754-LAC

TBX3 kodiert einen Transkriptionsfaktor der T‑Box‑Familie, der über eine konservierte T‑Box‑Domäne an DNA bindet, um entwicklungsbezogene Genprogramme, Zellschicksalsentscheidungen und Gewebemusterbildung zu regulieren. In menschlichen Zellen wirkt TBX3 vor allem als Transkriptionsrepressor oder als kontextabhängiger Modulator der Genexpression und integriert Signale, die die Zellzykluskontrolle, Differenzierung und Seneszenz beeinflussen. Es steht in Wechselwirkung mit Signalwegen, die die Linienfestlegung und Proliferation steuern, darunter Netzwerke im Zusammenhang mit der Wnt/β‑Catenin‑Signalgebung und p53‑assoziierten Checkpoints. Eine fehlregulierte TBX3‑Expression wurde mit angeborenen Entwicklungsstörungen in Verbindung gebracht und in der Krebsbiologie aufgrund ihrer Rollen bei Proliferation, Invasion und stammzellähnlichen transkriptionellen Zuständen untersucht.

TBX3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente TBX3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TBX3 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der TBX3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TBX3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen TBX3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.