Plásmido Doble Nickase (m) TBC1D15: sc-426147-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)TBC1D15 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa TBC1D15 (m) y el plásmido de doble nickasa TBC1D15 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tbc1d15. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) TBC1D15 | sc-426147-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tbc1d15 codifica TBC1D15, una proteína activadora de GTPasas Rab implicada en el control del tráfico intracelular de membranas y la dinámica de los orgánulos. En células de ratón, TBC1D15 se ha vinculado con la homeostasis mitocondrial, incluida la regulación de la morfología y el recambio de las mitocondrias, y se conecta con vías que gobiernan la autofagia/mitofagia y el transporte endolisosomal. Al modular pasos de tráfico dependientes de Rab, TBC1D15 puede influir en las respuestas celulares al estrés y en la adaptación metabólica. La desregulación de estos procesos es relevante en estudios de neurodegeneración, inflamación y biología del cáncer, donde el control alterado de la calidad mitocondrial y el tráfico de vesículas contribuyen a mecanismos patogénicos.
TBC1D15 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tbc1d15 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tbc1d15. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tbc1d15. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tbc1d15 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.