TARDBP Lentiviral Activation Particles (m): sc-433014-LAC

Das murine Gen **Tardbp** kodiert **TARDBP (TDP-43)**, ein ubiquitär exprimiertes RNA/DNA-bindendes Protein, das das Spleißen von prä-mRNA, den RNA-Transport, die mRNA-Stabilität und die microRNA-Biogenese reguliert. TARDBP ist an Signalwegen des RNA-Stoffwechsels und an der Dynamik von Stressgranula beteiligt und pendelt zwischen Zellkern und Zytoplasma, um Genexpressionsprogramme zu koordinieren, die mit neuronaler Aufrechterhaltung und zellulärer Homöostase verknüpft sind. Störungen der TARDBP-Mengen oder seiner Lokalisation gehen mit veränderter RNA-Prozessierung, einem Ungleichgewicht der Proteostase und fehlregulierten Antworten auf zellulären Stress einher. Diese Eigenschaften machen **Tardbp** zu einem zentralen Forschungsziel in Studien zu Netzwerken RNA-bindender Proteine, zu für Neurodegeneration relevanten Mechanismen und zur transkriptomweiten Regulation.

TARDBP Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tardbp-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

TARDBP Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tardbp-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen TARDBP-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tardbp-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.