Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) TARDBP: sc-433014-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) TARDBP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TARDBP Double Nickase (m) et le plasmide TARDBP Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Tardbp. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TARDBP Antibody (E-10): sc-376311
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) TARDBP | sc-433014-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tardbp code TARDBP (TDP-43), une protéine de liaison à l’ARN/ADN principalement nucléaire qui régule l’épissage des pré-ARNm, la stabilité et le transport des ARNm, ainsi que la biogenèse des microARN, via la reconnaissance de motifs riches en UG. TARDBP participe à la dynamique des granules d’ARN et aux réponses au stress, influençant l’intégrité du transcriptome et la protéostasie en conditions de stress cellulaire. Dans les systèmes murins, Tardbp est largement utilisé pour étudier le métabolisme de l’ARN dans les neurones et les cellules gliales, la rétroaction autorégulatrice sur son propre transcrit, ainsi que les interactions avec les voies contrôlant le transport nucléocytoplasmique et la traduction. La dérégulation de la fonction de TARDBP et sa mauvaise localisation sont fortement associées à la neurodégénérescence et à la biologie de l’agrégation protéique, ce qui en fait une cible majeure pour les études mécanistiques des pathologies impliquant des protéines liant l’ARN.
TARDBP Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Tardbp dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Tardbp. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Tardbp. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Tardbp.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.