Plasmide Double Nickase (h) TAAR5: sc-409205-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TAAR5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TAAR5 Double Nickase (h) et le plasmide TAAR5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TAAR5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TAAR5 | sc-409205-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TAAR5 | sc-409205-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TAAR5 (récepteur 5 associé aux amines traces) code un récepteur couplé aux protéines G de type rhodopsine qui détecte des amines biogènes à l’état de traces et des ligands odorants apparentés, contribuant à la signalisation chimiosensorielle. Après activation, TAAR5 est généralement couplé à des voies impliquant des protéines G hétérotrimériques qui modulent la signalisation par seconds messagers, tels que l’AMPc, ainsi que les réponses transcriptionnelles en aval, intégrant des signaux issus de métabolites extracellulaires dans la physiologie cellulaire. Bien qu’il soit surtout caractérisé dans les neurones olfactifs, l’expression de TAAR5 a également été rapportée dans certains tissus périphériques, suggérant des rôles plus larges au sein de réseaux de signalisation neuromodulatrice et métabolique. Des altérations de la signalisation de la famille TAAR ont été étudiées dans le contexte de phénotypes neuropsychiatriques et de différences de traitement sensoriel, faisant de TAAR5 une cible utile pour des études mécanistiques de la fonction des RCPG et de la signalisation induite par les ligands.
TAAR5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TAAR5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TAAR5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TAAR5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TAAR5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.