T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Particles (h): sc-418331-LAC
- Zielspezies: human
- 200 µl transduktionsfertige, hoch-titer CRISPR/dCas9 Lentivirale Aktivierungs-Partikel
- T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Particles (h) sind ein SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) gesteuertes System zur Transkriptionsaktivierung eines gewünschten Zielgens, um wirkungsvoll die spezifische Genexpression mittels lentiviraler Transduktion der Zellen zu erhöhen
- T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Particles (h) enthalten die folgenden SAM Aktivierungselemente: deaktivierte Cas9 (dCas9) Nuklease (D10A und N863A) fusioniert an die Transaktivierungs-Domäne VP64, ein MS2-p65-HSF1 Fusionsprotein und eine zielspezifische 20nt gRNA. Des Weiteren enthalten sind die Resistenzgene für blasticidin, hygromycin und puromycin
- Der entstehende SAM-Komplex (Mediator-Komplex zur synergistischen Gen-Aktivierung) bindet eine sequenzspezifische Region 200-250 nt upstream (in 5'-Richtung) des Transkriptionsstartsignals und rekrutiert dort ständig Transkriptionsfaktoren für eine verstärkte Gen-Aktivierung und Gen-Expression.
- Die von T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Plasmid (h) und T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Plasmid (h2) kodierten gRNAs zielen auf unterschiedliche regulatorische Regionen des CACNA1G-Promotors ab. Eines oder beide Designs sind möglicherweise verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
T-type Ca++ CP α1G Lentiviral Activation Particles (h) | sc-418331-LAC | 200 µl | $455.00 |
CACNA1G kodiert den menschlichen T‑Typ‑Calciumkanal α1G (Cav3.1), einen bei niedrigen Spannungen aktivierten Kanal, der einen transienten Ca²⁺‑Einstrom nahe dem Ruhepotenzial ermöglicht. Indem Cav3.1 die Membranerregbarkeit, Rebound‑Bursting und oszillatorische Entladungsmuster mitprägt, beeinflusst er die neuronale und kardiale Elektrophysiologie und koppelt elektrische Aktivität an calciumabhängige Signalwege, einschließlich calmodulinregulierter Pfade und nachgeschalteter Transkriptionsprogramme. Eine veränderte CACNA1G‑Aktivität wurde mit Erkrankungen in Verbindung gebracht, die durch abnorme Rhythmik und Erregbarkeit gekennzeichnet sind, darunter eine erhöhte Anfallsneigung und kardiale Erregungsleitungs‑Phänotypen; zudem wird das Gen häufig im Kontext einer Dysregulation der Calcium‑Signalübertragung untersucht. Als membranständiger Ionenkanal stellt CACNA1G außerdem eine mechanistische Verbindung zwischen stimulusabhängigem Ca²⁺‑Einstrom und zellulären Prozessen wie Neurotransmitterfreisetzung, Schrittmacheraktivität und aktivitätsabhängiger Genexpression her.
T-type Ca++ CP α1G Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CACNA1G-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.
T-type Ca++ CP α1G Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CACNA1G-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen T-type Ca++ CP α1G-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CACNA1G-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.
Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.