Synaptojanin 2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-411221-LAC

SYNJ2 kodiert Synaptojanin 2, eine Phosphoinositid-Phosphatase, die PI(4,5)P2 und PI(3,4,5)P3 hydrolysiert und dadurch während der Endozytose und des Rezeptortransports die Lipidzusammensetzung von Membranen reguliert. Über seine Effekte auf clathrinvermittelte Internalisierung, Aktin-Remodelling und die Phosphoinositid-Signalübertragung trägt Synaptojanin 2 zur Koordination der Vesikeldynamik, des Turnovers fokaler Adhäsionen und nachgeschalteter Signalwege wie PI3K–AKT bei. Eine veränderte SYNJ2-Expression oder -Aktivität wurde in Krebsmodellen mit dysregulierter Migration und invasiven Phänotypen sowie mit Störungen der neuronalen und synaptischen Membranhomöostase in Verbindung gebracht. Diese Funktionen machen SYNJ2 zu einem nützlichen Ziel, um die phosphoinositidgesteuerte Kontrolle von vesikulärem Transport, Signalabschaltung und Zytoskelettorganisation in menschlichen Zellen zu untersuchen.

Synaptojanin 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente SYNJ2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Synaptojanin 2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der SYNJ2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Synaptojanin 2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen SYNJ2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.