Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-423239

Übersicht

Syngr2 kodiert Synaptogyrin-2, ein tetraspanes synaptisches Vesikelmembranprotein, das in präsynaptischen Endigungen angereichert ist und dort zur Organisation der Vesikel sowie zur Dynamik der Neurotransmitterfreisetzung beiträgt. Synaptogyrin-2 ist am synaptischen Vesikelzyklus beteiligt und beeinflusst die Kopplung von Exozytose und Endozytose sowie den Vesikeltransport in neuronalen und neuroendokrinen Zellen. Über seine Rolle bei der Regulation der Vesikelverfügbarkeit und der Freisetzungswahrscheinlichkeit sind SYNG2-bezogene Mechanismen für Untersuchungen zur synaptischen Plastizität und zur Funktion neuronaler Schaltkreise relevant. Eine veränderte präsynaptische Vesikelhandhabung ist ein wiederkehrendes Merkmal in Modellen neuroentwicklungsbedingter und neurodegenerativer Erkrankungen, wodurch Syngr2 ein nützliches Ziel für mechanistische Untersuchungen synaptischer Dysfunktion darstellt.

Das Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Syngr2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Syngr2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Syngr2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Synaptogyrin-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Syngr2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Synaptogyrin-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Syngr2-Exone abzielen, die für die Synaptogyrin-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Syngr2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Synaptogyrin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Syngr2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Synaptogyrin-2 HDR-Plasmid (m) und Synaptogyrin-2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Syngr2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Syngr2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.