Plasmide Double Nickase (h) SNX3: sc-404028-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SNX3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SNX3 Double Nickase (h) et le plasmide SNX3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SNX3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SNX3 Antibody (G-7): sc-376667
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SNX3 | sc-404028-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SNX3 | sc-404028-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SNX3 (sorting nexin 3) est une sorting nexin à domaine PX qui se lie au phosphatidylinositol-3-phosphate sur les endosomes précoces et contribue à organiser le tri des cargos à travers le système endosomal. C’est un composant clé du trafic associé au rétromer, en soutenant le transport de retour endosome-vers-Golgi et le recyclage régulé des protéines membranaires, ce qui façonne la disponibilité des récepteurs et la signalisation en aval. Par ses rôles dans le remodelage membranaire et la sélection des cargos, SNX3 influence des processus tels que l’absorption des nutriments, l’atténuation des signaux et le maintien de la polarité cellulaire. Les voies de trafic endosomal dérégulées impliquant SNX3 et la fonction du rétromer sont fréquemment étudiées dans le contexte de la neurodégénérescence, de l’entrée des agents pathogènes et de la signalisation altérée des récepteurs observées dans de multiples modèles de maladie.
SNX3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SNX3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SNX3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SNX3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SNX3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.