Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SMARCD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403091-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- SMARCD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il SMARCD2 Double Nickase Plasmid (h) e il SMARCD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira SMARCD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: SMARCD2 Antibody (F-34): sc-101162
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
SMARCD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403091-NIC | 20 µg | $410.00 |
SMARCD2 (BAF60B) codifica una subunità non catalitica del complesso di rimodellamento della cromatina SWI/SNF (BAF) dipendente dall’ATP, che modula il posizionamento dei nucleosomi per regolare la trascrizione, la specificazione di linea cellulare e l’accessibilità della cromatina. Attraverso interazioni con fattori di trascrizione e componenti core del complesso BAF, SMARCD2 contribuisce a programmi che governano la differenziazione ematopoietica, il controllo del ciclo cellulare e la regolazione dei geni dello sviluppo. La disregolazione delle subunità SWI/SNF, inclusa SMARCD2, è associata a stati epigenetici alterati e a un rimodellamento delle reti trascrizionali osservato in molteplici tumori e in altri disturbi della regolazione della cromatina. SMARCD2 rappresenta quindi un nodo utile per indagare i meccanismi di rimodellamento della cromatina e le reti trascrizionali dipendenti dal contesto nelle cellule umane.
SMARCD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus SMARCD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di SMARCD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di SMARCD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con SMARCD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.