Plasmide Double Nickase (h) SLC35A4: sc-414030-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) SLC35A4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide SLC35A4 Double Nickase (h) et le plasmide SLC35A4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC35A4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) SLC35A4 | sc-414030-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) SLC35A4 | sc-414030-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC35A4 code un membre de la famille des transporteurs de sucres nucléotidiques Solute Carrier 35, un groupe qui assure l’apport luminal de sucres activés vers le RE et l’appareil de Golgi pour les réactions de glycosylation. Bien que SLC35A4 soit moins bien caractérisé que d’autres paralogues de SLC35, il est impliqué dans la régulation de l’homéostasie des sucres nucléotidiques, laquelle influence la biosynthèse des glycoprotéines et des glycolipides, le repliement des protéines et le trafic intracellulaire. La perturbation du transport des sucres nucléotidiques et des réseaux de glycosylation en aval peut remodeler la composition et la signalisation à la surface cellulaire, affectant des processus tels que l’adhésion, la maturation des récepteurs et la reconnaissance immunitaire. Ainsi, SLC35A4 présente un intérêt pour des études mécanistiques en glycomique et en biologie de la voie sécrétoire, ainsi que pour l’exploration de la manière dont une glycosylation altérée contribue aux réponses au stress cellulaire et à des phénotypes associés aux maladies.
SLC35A4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC35A4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC35A4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC35A4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC35A4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.