SLC25A33 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413606

Descripción general

SLC25A33 codifica un transportador de la membrana interna mitocondrial implicado en el transporte de nucleótidos de pirimidina necesarios para el metabolismo de los ácidos nucleicos dentro de la mitocondria. Al apoyar la replicación y transcripción del ADN mitocondrial, así como el recambio de ARN, SLC25A33 vincula la homeostasis de nucleótidos con la capacidad de fosforilación oxidativa y con procesos más amplios de control de calidad mitocondrial. La alteración del transporte mitocondrial de nucleótidos puede perturbar la bioenergética y aumentar el estrés replicativo, conectando a esta familia de transportadores con mecanismos relevantes para la neurodegeneración, la disfunción metabólica y contextos de enfermedades proliferativas. Como resultado, SLC25A33 se estudia con frecuencia en modelos de mantenimiento mitocondrial, equilibrio redox y señalización adaptativa al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SLC25A33 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SLC25A33 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SLC25A33 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SLC25A33 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SLC25A33.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SLC25A33 para la investigación de la señalización de SLC25A33, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SLC25A33 críticos para la función de SLC25A33
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SLC25A33 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SLC25A33 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SLC25A33 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SLC25A33. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SLC25A33 (h) y el plásmido HDR SLC25A33 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SLC25A33 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SLC25A33 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.