Particules Lentivirales d'Activation (h) SLAM: sc-404289-LAC

Le gène humain **SLAMF1** code pour **SLAM (CD150)**, un récepteur de la superfamille des immunoglobulines exprimé principalement sur les cellules hématopoïétiques, notamment les lymphocytes T activés, les lymphocytes B, les cellules dendritiques et les macrophages. SLAM agit comme un ligand de lui-même et transmet des signaux via des motifs de commutation à base de tyrosine des récepteurs immunitaires, permettant le recrutement de protéines adaptatrices telles que SH2D1A/SAP et EAT-2, ce qui module des voies en aval régulant l’activation lymphocytaire, la production de cytokines, la cytotoxicité et les réponses des centres germinatifs. En modulant l’organisation de la synapse immunologique et des programmes de signalisation liés à NF-κB/MAPK, SLAM contribue à la coordination de la communication entre immunité adaptative et innée. Des altérations de la signalisation de SLAMF1 ont été associées à des phénotypes de dérégulation immunitaire et sont fréquemment étudiées dans le contexte de la biologie des infections, des réponses inflammatoires et des mécanismes des hémopathies malignes.

Les particules d'activation lentivirales SLAM (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SLAMF1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales SLAM (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SLAMF1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de SLAM. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SLAMF1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.