Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
SGLT-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-434235
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SGLT-2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SGLT-2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SGLT-2 Anticuerpo (D-6): sc-393350
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SGLT-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-434235 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Slc5a2 codifica el cotransportador sodio–glucosa SGLT-2, un transportador de alta capacidad que acopla los gradientes de Na⁺ a la reabsorción de glucosa a través de la membrana apical de las células epiteliales del túbulo proximal renal. Al regular el flujo transepitelial de glucosa, SGLT-2 influye en el balance energético celular y la homeostasis osmótica, y se relaciona con procesos de transporte iónico que determinan el manejo tubular de solutos y agua. La actividad alterada de SLC5A2/SGLT-2 se asocia con una glucosuria desregulada y con alteraciones de la homeostasis sistémica de la glucosa, por lo que es relevante para fenotipos metabólicos y estudios de fisiología renal. En ratones, Slc5a2 ofrece un modelo manejable para investigar los mecanismos de transporte de glucosa y las contribuciones renales a las respuestas al estrés metabólico.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SGLT-2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Slc5a2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Slc5a2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Slc5a2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SGLT-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Slc5a2 para la investigación de la señalización de SGLT-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Slc5a2 críticos para la función de SGLT-2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Slc5a2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SGLT-2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido SGLT-2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Slc5a2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SGLT-2 (m) y el plásmido HDR SGLT-2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Slc5a2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Slc5a2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.