SERF1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422894

Übersicht

Serf1 kodiert den Small EDRK-rich Factor 1 (SERF1), ein hochkonserviertes, intrinsisch ungeordnetes Protein, das mit der Proteostase und RNA-assoziierten Prozessen in Verbindung gebracht wird. SERF1 wurde mit der Modulation der Dynamik von Proteinaggregation und zellulären Stressantworten verknüpft; beschrieben sind zudem Interaktionen, die die nukleoläre Funktion und den RNA-Stoffwechsel beeinflussen. In Mausmodellen wird Serf1 hinsichtlich seiner Beiträge zur neuronalen und entwicklungsbezogenen Homöostase untersucht, wobei veränderte Proteostase-Netzwerke für Neurodegeneration und andere mit Proteinfehlfaltung assoziierte Phänotypen relevant sind. Loss- oder Gain-of-Function-Störungen von Serf1 unterstützen mechanistische Studien, die Chaperon-Signalwege, die Organisation von Ribonukleoproteinen und aggregationsanfällige Proteine miteinander in Beziehung setzen.

Das SERF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Serf1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Serf1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Serf1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SERF1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Serf1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SERF1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Serf1-Exone abzielen, die für die SERF1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Serf1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SERF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom SERF1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Serf1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SERF1 HDR-Plasmid (m) und SERF1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Serf1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Serf1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.