Plasmide Double Nickase (h) Septin 6: sc-405243-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Septin 6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Septin 6 Double Nickase (h) et le plasmide Septin 6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SEPT6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Septin 6 Antibody (B-8): sc-514781
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Septin 6 | sc-405243-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Septin 6 | sc-405243-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SEPT6 code la septine 6, une protéine cytosquelettique conservée liant le GTP, qui s’assemble en filaments et en anneaux de septines hétéro-oligomériques afin d’assurer l’échafaudage des membranes et de coordonner la dynamique de l’actine et des microtubules. La septine 6 contribue à la cytokinèse, à la polarité cellulaire, au trafic vésiculaire et à la compartimentation dans des sites tels que le sillon de clivage et les régions d’extension des neurites, influençant la forme cellulaire et la fidélité de la division. Par ses rôles dans le remodelage du cytosquelette et l’organisation membranaire, SEPT6 est étudié dans des voies contrôlant la progression mitotique et le transport intracellulaire. Une assemblage des septines dérégulé ou une expression altérée de SEPT6 a été associée à des phénotypes anormaux de prolifération et de différenciation, ce qui soutient sa pertinence dans l’étude de la biologie des cancers et des processus neurodéveloppementaux.
Septin 6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SEPT6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SEPT6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SEPT6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SEPT6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.