Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SEC13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403302
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- SEC13 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico SEC13, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: SEC13 Anticuerpo (F-6): sc-514308
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
SEC13 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403302 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
SEC13 codifica Sec13, un componente central de la cubierta COPII que se asocia con Sec31 para formar la jaula externa necesaria para la gemación de vesículas desde el retículo endoplásmico y el transporte del RE al Golgi. Más allá del tráfico secretor, Sec13 también participa en la arquitectura del complejo del poro nuclear y contribuye a la proteostasis al influir en la exportación de carga y en las respuestas al estrés del RE. Estas funciones vinculan a SEC13 con vías que regulan la remodelación de membranas, la secreción de proteínas y la homeostasis de los compartimentos intracelulares. La desregulación de la capacidad de la vía secretora y del transporte nuclear se aprovecha con frecuencia en estudios sobre la adaptación celular al estrés y la señalización proliferativa en contextos relevantes para enfermedades.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO SEC13 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SEC13 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SEC13 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SEC13 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SEC13.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SEC13 para la investigación de la señalización de SEC13, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de SEC13 críticos para la función de SEC13
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SEC13 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido SEC13 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SEC13 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SEC13. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SEC13 (h) y el plásmido HDR SEC13 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SEC13 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SEC13 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.