Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO SDHC (h): sc-405559
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- SDHC Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique SDHC, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: SDHC Antibody (C-2): sc-515102
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO SDHC (h) | sc-405559 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SDHC code la sous-unité C du complexe succinate déshydrogénase, un composant membranaire intrinsèque du complexe II mitochondrial qui ancre l’enzyme à la membrane interne mitochondriale et soutient le transfert d’électrons du succinate vers l’ubiquinone. Par son rôle à l’interface entre le cycle de l’acide tricarboxylique (TCA) et la phosphorylation oxydative, SDHC contribue au fonctionnement de la chaîne respiratoire, à l’équilibre rédox mitochondrial et au métabolisme énergétique cellulaire. Une altération de l’intégrité du complexe SDH peut perturber la gestion du succinate et les voies de signalisation en aval liées à la reprogrammation métabolique et aux réponses au stress. Un dysfonctionnement de SDHC a été associé à des mécanismes de maladies mitochondriales et à une biologie de prédisposition tumorale, ce qui en fait une cible pertinente pour étudier des phénotypes pilotés par le métabolisme et le contrôle qualité mitochondrial.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO SDHC (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SDHC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SDHC, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SDHC à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine SDHC.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SDHC pour l'étude de la signalisation de SDHC, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SDHC essentiels à la fonction de SDHC
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SDHC pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le SDHC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le SDHC plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SDHC. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le SDHC plasmide HDR (h) et le SDHC (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SDHC pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SDHC définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.