Sarcospan CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421332

개요

Sspn은 사코스판(sarcospan)을 암호화하는 유전자로, 사코스판은 디스트로핀–당단백질 복합체의 일부를 이루는 테트라스팬 막단백질이며 라미닌 결합 수용체 어셈블리를 안정화함으로써 근섬유막(sarcolemma)의 조직화를 돕습니다. 골격근과 심장근에서 사코스판은 수축 중 막의 무결성을 지지하고, 연관된 사코글리칸(sarcoglycans)과 인테그린(integrins)의 분포와 기능에 영향을 주어 기계적 신호전달(mechanotransduction)에 기여합니다. 사코스판 의존적 복합체 조립의 변화는 근육의 취약성과 재생 장애와 연관되어 왔으며, 따라서 Sspn은 근이영양증 표현형과 관련된 경로를 연구하는 데 유용한 출발점이 됩니다. 또한 사코스판은 세포외기질 상호작용과 막 미세영역(membrane microdomain) 조직에도 영향을 미치므로, 근섬유 손상, 염증, 리모델링 모델에서 자주 분석됩니다.

Sarcospan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Sspn 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Sspn 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Sspn의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Sarcospan 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Sarcospan 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Sspn 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Sarcospan 기능에 중요한 Sspn 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Sspn 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Sarcospan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Sarcospan CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Sspn 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Sarcospan HDR 플라스미드 (m) 및 Sarcospan HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Sspn 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Sspn 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.