SAMD4A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406449

Übersicht

SAMD4A (Sterile-Alpha-Motiv-Domäne enthaltend 4A) ist ein RNA-bindendes regulatorisches Protein, das an der posttranskriptionellen Kontrolle der Genexpression beteiligt ist, indem es spezifische Motive in Ziel‑mRNAs erkennt. Es wirkt an der Stabilität und Lokalisation von mRNA sowie an der Repression der Translation mit und verknüpft die Aktivität von SAMD4A damit mit Zellzustandsübergängen und stressadaptiven Programmen, die das Proteom umgestalten. Über diese Funktionen kann SAMD4A Signalwege beeinflussen, die Proliferation, Differenzierung und immunbezogene Signaloutputs steuern, indem es die Translation von Komponenten dieser Signalwege moduliert. Eine veränderte Regulation von SAMD4A wurde im Kontext krebsassoziierter Genexpressionsprogramme und inflammatorischer Phänotypen untersucht, bei denen eine dysregulierte RNA‑Metabolik zu krankheitsrelevantem Zellverhalten beiträgt.

Das SAMD4A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SAMD4A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SAMD4A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SAMD4A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die SAMD4A-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SAMD4A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der SAMD4A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SAMD4A-Exone abzielen, die für die SAMD4A-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SAMD4A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom SAMD4A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom SAMD4A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SAMD4A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das SAMD4A HDR-Plasmid (h) und SAMD4A HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SAMD4A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SAMD4A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.