S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드(h2): sc-413030-ACT-2
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- S-100PBP CRISPR Activation Plasmid (h2) 는 synergistic activation mediator (SAM) transcription activation system으로 특정유전자 발현을 upregulate하도록 디자인되였습니다.
- S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드(h2)는 1:1:1의 질량 비율로 3개의 플라스미드로 구성되어 있습니다: 비활성화된 Cas9(dCas9) 뉴클레아제(D10A 및 N863A)를 트랜스활성화 도메인 VP64에 융합한 플라스미드와 블라스티시딘 저항 유전자; MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 코딩하는 플라스미드와 하이그로마이신 저항 유전자; 표적 특이적인 20nt 가이드 RNA가 두 개의 MS2 RNA 아파테머에 융합되어 있고, 푸로마이신 내성 유전자
- The resulting SAM complex binds to a site-specific region approximately 200-250 nt upstream of the transcriptional start site and provides robust recruitment of transcription factors for highly efficient gene activation
- S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드 (h2) 및 S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드 (h22)에 의해 암호화되는 gRNA는 S100PBP 전사 개시점 상류의 서로 다른 조절 영역을 표적으로 합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 사용할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드(h2) | sc-413030-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
인간 S100PBP(S-100P 결합 단백질)는 S100PBP 유전자에 의해 암호화되며, 칼슘 결합 단백질인 S100P의 세포내 결합 파트너로서 Ca2+ 의존적 신호전달을 세포골격 조직화 및 세포 부착 역학과 조율하는 데 관여하는 것으로 알려져 있다. 이 단백질은 미세소관 관련 과정의 조절과 연관되어 왔고, 세포의 극성 및 운동성을 조절하는 단백질-단백질 상호작용 네트워크를 통해 소포 수송과 세포주기 관련 사건에도 영향을 미칠 수 있다. 또한 여러 종양 맥락에서 S100PBP의 발현 양상이 변화한다는 보고가 있어, 임상적 결과를 시사하지는 않으면서도 이동, 침윤, 상피-간엽 전이(EMT)의 기저 기전을 규명하는 데 유용한 표적으로 여겨진다. 인간 세포 모델에서 S100PBP를 유전자 편집하거나 교란하면 S100P 중심 경로의 기능을 탐색하고 상호작용 파트너를 매핑하며, 암생물학 및 세포 신호전달 연구와 관련된 하위 전사 변화와 표현형 변화를 평가할 수 있다.
S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드(h2)는 기본 DNA 서열을 변경하지 않고 내인성 S100PBP 발현을 상향 조절하는 표적화된 비파괴적 접근법을 제공합니다.
S-100PBP CRISPR 활성화 플라스미드(h2)는 인간 세포주에서 S100PBP 유전자좌의 고효율, 위치 특이적 전사 상향 조절을 위해 설계된 3개의 플라스미드로 구성된 시너지 활성화 매개체(SAM) 시스템입니다. 이 시스템은 DNA 결합 능력은 유지하면서 뉴클레아제 활성을 제거하는 두 가지 비활성화 돌연변이(D10A 및 N863A)를 지닌 촉매 활성 없는 Cas9(dCas9)을 중심으로 구축되었습니다. 이 dCas9은 강력한 전사 활성화제인 VP64와 융합되어 있으며, 선별을 위해 블라스티시딘 내성 유전자와 함께 발현됩니다. 두 번째 플라스미드는 dCas9-VP64와 협동하여 작용하는 2차 활성화 복합체인 MS2-p65-HSF1 융합 단백질을 암호화하며, 히그로마이신 내성 유전자와 함께 존재한다. 세 번째 플라스미드는 표적 특이적 20nt sgRNA를 암호화하며, 이는 MS2-p65-HSF1 복합체를 활성화 부위로 유인하는 두 개의 MS2 RNA 아파타머와 융합되어 있으며, 푸로마이신 내성 유전자가 함께 포함되어 있습니다. 세 플라스미드는 모든 시스템 구성 요소의 균형 잡힌 발현을 위해 질량비 1:1:1로 전달됩니다.
표적 부위에 조립되면 SAM 복합체는 S100PBP 전사 시작점의 상류 약 200bp 지점에 결합하며, 이곳에서 VP64, p65 및 HSF1이 협력하여 전사 기구를 모집하고 내인성 S-100PBP 발현의 상향 조절을 유도합니다. 핵산분해 활성을 가진 Cas9과 달리, dCas9은 이중 가닥 절단을 유발하거나 게놈 서열을 변형시키지 않아, 원형 S100PBP 위치를 보존하고 내인성 위치에서 S-100PBP 의존적 전사 반응을 연구할 수 있게 하여, 기능 연구, 표적 유전자 식별 및 S100PBP 발현이 침묵되거나 감소된 종양 세포에서 S-100PBP 경로 복원을 모델링하는 데 유용한 도구입니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.