RTP4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426736

Descripción general

La proteína transportadora del receptor 4 (RTP4) es un miembro de la familia RTP implicado en el tráfico intracelular y en la expresión funcional de determinados receptores acoplados a proteína G (GPCR), influyendo en la maduración del receptor, su localización en la membrana y su capacidad de respuesta a señales. En el ratón, la expresión de Rtp4 se asocia comúnmente con programas génicos estimulados por interferón y con la señalización de la inmunidad innata, lo que la vincula a la regulación de respuestas antivirales y de estados transcripcionales inflamatorios. A través de sus efectos sobre el procesamiento de receptores y las vías asociadas a la inmunidad, RTP4 puede moldear las respuestas celulares a señales extracelulares y a entornos de citocinas. La desregulación de la señalización relacionada con RTP4 y la activación de la vía del interferón se estudian con frecuencia en contextos como las interacciones neuroinmunes, los modelos de infección y los fenotipos asociados a la inflamación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RTP4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Rtp4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Rtp4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Rtp4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RTP4.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Rtp4 para la investigación de la señalización de RTP4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Rtp4 críticos para la función de RTP4
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Rtp4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RTP4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido RTP4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Rtp4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RTP4 (m) y el plásmido HDR RTP4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Rtp4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Rtp4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.