Rrn3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403709

개요

RRN3는 리보솜 DNA(rDNA)로 RNA 중합효소 I(Pol I)을 모집하는 데 도움을 주고 pre-rRNA 합성을 지원하는 Pol I 연관 전사인자인 Rrn3를 암호화하며, 성장 신호를 리보솜 생합성과 연결합니다. Rrn3의 활성은 영양 및 스트레스 반응성 신호에 의해 조절되는데, 여기에는 Pol I 전사 개시를 mTOR 의존적으로 제어하는 경로가 포함됩니다. 또한 Rrn3는 rRNA 산출량을 조절함으로써 핵소체 기능과 단백질 항상성(proteostasis)에 기여합니다. rDNA 전사는 세포 증식 및 스트레스 적응과 긴밀히 연동되어 있기 때문에, RRN3–Pol I 역학의 변화는 성장 조절 이상, 유전체 불안정성, 핵소체 스트레스 표현형과 같은 맥락에서 연구됩니다. 따라서 RRN3는 리보솜 생합성이 세포주기 조절 및 대사 재프로그래밍과 어떻게 맞물리는지를 탐구하는 데 중요한 표적입니다.

Rrn3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 RRN3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 RRN3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 RRN3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Rrn3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Rrn3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 RRN3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Rrn3 기능에 중요한 RRN3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 RRN3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Rrn3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Rrn3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 RRN3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Rrn3 HDR 플라스미드 (h) 및 Rrn3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 RRN3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 RRN3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.