Plasmide Double Nickase (m) Ribosomal Protein L8: sc-424161-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Ribosomal Protein L8 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Ribosomal Protein L8 Double Nickase (m) et le plasmide Ribosomal Protein L8 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Rpl8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Ribosomal Protein L8 | sc-424161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Ribosomal Protein L8 | sc-424161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Chez la souris, Rpl8 code la protéine ribosomique L8, un composant essentiel de la grande sous-unité ribosomique 60S, qui participe à la biogenèse des ribosomes et à l’efficacité de l’élongation de la traduction. En tant qu’élément de la machinerie ribosomique, RPL8 contribue aux programmes de protéostasie qui s’articulent avec le contrôle de la traduction régulé par mTOR et avec la réponse cellulaire à la disponibilité en nutriments et au stress. Des perturbations des protéines ribosomiques peuvent dérégler la synthèse protéique globale et activer des voies de stress nucléolaire qui croisent la régulation du cycle cellulaire et la signalisation de p53. Comme la production ribosomique influence la prolifération, la différenciation et l’adaptation au stress, Rpl8 est fréquemment étudié dans des contextes où la capacité de traduction et l’intégrité des ribosomes déterminent des phénotypes pertinents pour les maladies.
Ribosomal Protein L8 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Rpl8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Rpl8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Rpl8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Rpl8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.