Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Rab 14 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-427035-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab 14O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Rab 14 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Rab 14 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Rab14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab 14 Anticorpo (D-5): sc-271401
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab 14 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-427035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Rab 14 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-427035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O Rab14 de camundongo codifica a pequena GTPase Rab14, um membro da superfamília RAS que coordena o tráfego intracelular de membranas ao alternar entre os estados ligados a GDP e a GTP. Rab14 regula a reciclagem endocítica e o transporte biossintético entre o Golgi, os endossomos e a membrana plasmática, influenciando a triagem de cargas, a renovação de receptores e a maturação de vesículas por meio de interações com efetores e com a maquinaria de SNAREs. Esses processos se cruzam com vias de sinalização, captação de nutrientes e organização do citoesqueleto, tornando Rab14 um ponto útil para estudar perturbações na dinâmica de membranas. A desregulação do tráfego dependente de Rab14 tem sido associada na literatura a alterações na migração celular e na homeostase metabólica, e é frequentemente investigada em modelos de distúrbios proliferativos e neurobiológicos nos quais o transporte vesicular contribui para o fenótipo.
Rab 14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Rab14 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Rab14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Rab14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Rab14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.