pyridoxal phosphatase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406810

개요

PDXP는 피리독살 인산가수분해효소(pyridoxal phosphatase)를 암호화하며, 이는 비타민 B6의 활성형인 피리독살 5′-인산(PLP)을 가수분해하는 세포질 효소입니다. 이를 통해 세포 내 PLP 이용 가능성과 비타민 B6 비타머(vitamer) 항상성 조절에 기여합니다. PLP는 다양한 아미노기전이효소(aminotransferase), 탈카복실화효소(decarboxylase), 그리고 일탄소 대사 및 신경전달물질 관련 대사의 여러 효소에 필수 보조인자이므로, PDXP의 활성은 간접적으로 아미노산 전환과 더 넓은 대사 플럭스에 영향을 줄 수 있습니다. 보조인자 균형을 유지하는 역할을 통해 PDXP는 대사 적응, 산화환원(redox) 연계 경로, 그리고 효소-보조인자 조절을 연구하는 데 관련성이 있습니다. PLP 의존적 대사의 변화는 다양한 질병 관련 맥락에서 연관성이 제기되어 왔기 때문에, PDXP는 대사 관련 세포 표현형의 기전을 규명하는 연구에서 유용한 표적이 됩니다.

pyridoxal phosphatase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PDXP 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PDXP 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PDXP의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 pyridoxal phosphatase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 pyridoxal phosphatase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PDXP 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• pyridoxal phosphatase 기능에 중요한 PDXP 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PDXP 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• pyridoxal phosphatase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 pyridoxal phosphatase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PDXP 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  pyridoxal phosphatase HDR 플라스미드 (h) 및 pyridoxal phosphatase HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PDXP 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PDXP 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.