PTTG2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418367

Descripción general

PTTG2 (gen transformador de tumores hipofisarios 2) codifica una proteína tipo securina implicada en la regulación de la separación de las cromátidas hermanas y la progresión del ciclo celular, con vínculos al control del punto de control mitótico y al mantenimiento de la estabilidad genómica. Como parte de vías que coordinan el inicio de la anafase y la actividad de proteasas implicadas en la segregación cromosómica, una expresión alterada de PTTG2 puede influir en la proliferación, la aneuploidía y las respuestas de estrés celular. Se ha descrito desregulación de miembros de la familia PTTG en múltiples tipos de tumores, lo que respalda la investigación de PTTG2 en contextos de señalización oncogénica y fenotipos impulsados por el ciclo celular. Por ello, el PTTG2 humano es relevante para estudios mecanísticos de la mitosis, el daño asociado a la replicación y los programas transcripcionales acoplados al estado proliferativo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTTG2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTTG2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTTG2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTTG2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTTG2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTTG2 para la investigación de la señalización de PTTG2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PTTG2 críticos para la función de PTTG2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTTG2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PTTG2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTTG2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTTG2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTTG2 (h) y el plásmido HDR PTTG2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTTG2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTTG2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.