Plásmido Doble Nickase (h) PTCD1: sc-408214-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PTCD1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PTCD1 (h) y el plásmido de doble nickasa PTCD1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PTCD1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PTCD1 | sc-408214-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PTCD1 | sc-408214-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PTCD1 codifica una proteína mitocondrial con repeticiones pentatricopeptídicas (PPR) que se une a RNAs de orgánulos y favorece la regulación postranscripcional de la expresión génica mitocondrial. Participa en el procesamiento y la estabilidad del RNA mitocondrial, influyendo en la función del mitorribosoma y en el ensamblaje de los complejos de fosforilación oxidativa (OXPHOS) necesarios para un transporte electrónico eficiente y la producción de ATP. A través de estas funciones, PTCD1 contribuye a la proteostasis mitocondrial y al metabolismo energético celular, procesos estrechamente ligados a las respuestas al estrés y al control de calidad mitocondrial. La desregulación del metabolismo del RNA mitocondrial y de OXPHOS es de amplia relevancia en estudios de neurodegeneración, disfunción cardiometabólica y remodelación metabólica de células cancerosas.
PTCD1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PTCD1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PTCD1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PTCD1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PTCD1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.