PRMT2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420951

Übersicht

Prmt2 kodiert die Protein-Arginin-Methyltransferase 2 (PRMT2), eine PRMT des Typs I, die die asymmetrische Dimethylierung von Argininresten an Histonen und nicht-histonischen Substraten katalysiert, um die Chromatinstruktur und Proteinfunktion zu modulieren. Die PRMT2-Aktivität beeinflusst die transkriptionelle Regulation sowie die Dynamik von Koregulatoren in Signalwegen nukleärer Rezeptoren und anderen Signalwegen und verknüpft damit die Argininmethylierung mit kontextabhängigen Genexpressionsprogrammen. In Mausmodellen wurde PRMT2 mit der Kontrolle von Zellproliferation, Differenzierung und der Regulation inflammatorischer Gene über epigenetische und posttranslationale Mechanismen in Verbindung gebracht. Fehlregulierte, PRMT2-abhängige Methylierung und transkriptionelle Netzwerke wurden mit krankheitsrelevanten Prozessen wie tumorassoziierten Signalwegen, metabolischen Stressantworten und Immundysregulation in Zusammenhang gebracht, was PRMT2 als mechanistischen Knotenpunkt für Pathway-Studien unterstützt.

Das PRMT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Prmt2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Prmt2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Prmt2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die PRMT2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Prmt2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der PRMT2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Prmt2-Exone abzielen, die für die PRMT2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Prmt2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom PRMT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom PRMT2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Prmt2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das PRMT2 HDR-Plasmid (m) und PRMT2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Prmt2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Prmt2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.