Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PP1γ (m2): sc-422379-KO-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PP1γ Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PP1γ, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PP1γ Antibody (E-4): sc-515943
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PP1γ (m2) | sc-422379-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ppp1cc code la protéine murine phosphatase 1 gamma (PP1γ), une phosphatase catalytique sérine/thréonine qui contrôle la signalisation dépendante de la phosphorylation en déphosphorylant divers substrats dans le noyau et le cytoplasme. PP1γ fonctionne au sein d’holoenzymes multiprotéiques qui orientent la spécificité vers des processus tels que la progression du cycle cellulaire, la dynamique de la chromatine, le traitement des ARN et le remodelage du cytosquelette. Par ces voies, PP1γ contribue à la régulation de la sortie de mitose, des réponses aux dommages de l’ADN et des programmes de différenciation cellulaire. Une signalisation dérégulée de la famille PP1 et une homéostasie de la phosphorylation altérée sont associées à des mécanismes pertinents pour les troubles prolifératifs, l’instabilité génomique et la neurobiologie, ce qui soutient son utilisation dans des études fonctionnelles centrées sur les voies de signalisation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PP1γ (m2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ppp1cc dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ppp1cc, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ppp1cc à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PP1γ.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ppp1cc pour l'étude de la signalisation de PP1γ, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ppp1cc essentiels à la fonction de PP1γ
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ppp1cc pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PP1γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PP1γ plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ppp1cc. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PP1γ plasmide HDR (m) et le PP1γ (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ppp1cc pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ppp1cc définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.