Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (m) PMS2: sc-422324-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)PMS2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PMS2 (m) y el plásmido de doble nickasa PMS2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Pms2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: PMS2 Anticuerpo (B-3): sc-25315
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) PMS2 | sc-422324-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Pms2 del ratón codifica PMS2, un componente central del complejo MutLα junto con MLH1, que coordina la reparación de desajustes del ADN tras errores de replicación. PMS2 aporta actividad endonucleasa que ayuda a iniciar los pasos de escisión y resíntesis, conectando el reconocimiento del desajuste con la reparación posterior mediante interacciones con PCNA, EXO1 y las ADN polimerasas. A través de estos procesos, PMS2 contribuye a la estabilidad del genoma, a la supresión de la inestabilidad de microsatélites y al mantenimiento de la fidelidad del ciclo celular. La alteración de la función de PMS2 se asocia con tasas elevadas de mutación y se ha implicado en síndromes de predisposición al cáncer y en mecanismos patológicos más amplios relacionados con la reparación del ADN, lo que lo convierte en una diana clave para estudiar la mutagénesis y las respuestas de puntos de control en modelos murinos.
PMS2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Pms2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Pms2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Pms2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Pms2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.