Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO PMS2 (m): sc-422324
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- PMS2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique PMS2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PMS2 Antibody (B-3): sc-25315
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO PMS2 (m) | sc-422324 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin *Pms2* code la protéine PMS2, un composant central du complexe de réparation des mésappariements MutLα avec MLH1, qui corrige les mésappariements base–base et les boucles d’insertion–délétion apparaissant lors de la réplication de l’ADN. PMS2 apporte une activité endonucléase qui coordonne les étapes d’excision et de resynthèse, contribuant ainsi à la stabilité du génome et à une signalisation adéquate des dommages à l’ADN. Par son rôle dans la réparation post-réplicative et le maintien de l’intégrité des microsatellites, une altération de la fonction de PMS2 est associée à une augmentation du taux de mutations et à des réponses dérégulées au stress de réplication. En recherche, la perturbation de *Pms2* est utilisée pour modéliser une déficience de la réparation des mésappariements et pour étudier l’accumulation de mutations, les interactions entre voies de réparation de l’ADN et les réponses des points de contrôle.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO PMS2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Pms2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Pms2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Pms2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine PMS2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Pms2 pour l'étude de la signalisation de PMS2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Pms2 essentiels à la fonction de PMS2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Pms2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le PMS2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le PMS2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Pms2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le PMS2 plasmide HDR (m) et le PMS2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Pms2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Pms2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.