Plásmido Doble Nickase (m) Per2: sc-422193-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Per2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Per2 (m) y el plásmido de doble nickasa Per2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Per2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Per2 | sc-422193-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen Per2 de ratón (regulador circadiano Period 2) codifica un componente central del reloj circadiano molecular que participa en el bucle de retroalimentación transcripcional‑traduccional que controla la expresión génica rítmica. PER2 forma complejos con otras proteínas del reloj para modular la actividad de CLOCK–BMAL1, dando forma a las oscilaciones del metabolismo, la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la señalización neuronal y endocrina. La alteración de la función de Per2 se ha asociado con ritmos circadianos desorganizados y con cambios posteriores en la señalización inflamatoria, la homeostasis metabólica y las vías de respuesta al estrés. En investigación biomédica, Per2 se estudia con frecuencia por su papel en la regulación dependiente del tiempo de la fisiología y por cómo la desregulación circadiana influye en fenotipos relevantes para enfermedades en modelos murinos.
Per2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Per2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Per2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Per2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Per2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.