PEPT1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401259

개요

SLC15A1은 상피세포의 정단막(apical membrane)에 존재하는 양성자(H+)-공동수송 올리고펩타이드 수송체인 PEPT1을 암호화하며, 상피 장벽을 가로질러 식이성 di- 및 tripeptide(2·3개 아미노산으로 이루어진 펩타이드)와 다양한 펩타이드 유사 기질의 흡수를 매개한다. PEPT1의 활성은 막을 사이에 형성된 H+ 기울기와 영양분 흡수를 통합하여, 장내 수송을 세포 내 아미노산 가용성 및 그 하류의 대사·스트레스 반응 과정과 연결한다. 발현은 소장에서 가장 높고, 염증이나 대사성 교란이 있을 때 다른 상피에서도 유도될 수 있으며, 그 결과 장벽 조직에서 기질의 이동(플럭스)에 영향을 준다. SLC15A1/PEPT1 기능 이상은 장 염증, 흡수장애(malabsorption) 표현형, 그리고 약리·독성 연구와 관련된 펩타이드 모방(유사) 화합물의 처리 변화 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔다.

PEPT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC15A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC15A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC15A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PEPT1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PEPT1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC15A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PEPT1 기능에 중요한 SLC15A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC15A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PEPT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PEPT1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC15A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PEPT1 HDR 플라스미드 (h) 및 PEPT1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC15A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC15A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.