Partículas Lentivirales de Activación (h) Peg10: sc-406028-LAC

El PEG10 humano codifica Peg10, una proteína tipo gag/pol derivada de un retrotransposón domesticado que favorece la unión a ARN y la regulación posranscripcional, con funciones destacadas en el crecimiento celular, la supervivencia y los programas de linaje. La actividad de Peg10 se cruza con la proteostasis mediada por ubiquitina, el control del ciclo celular y redes de señalización que moldean la proliferación y la diferenciación, incluidos contextos como el desarrollo placentario. La desregulación de la expresión de PEG10 se ha asociado con umbrales apoptóticos alterados y fenotipos invasivos en múltiples modelos relevantes para enfermedades, lo que lo convierte en un nodo útil para estudiar el control transcripcional y las respuestas al estrés oncogénico. En investigación biomédica, PEG10 sirve como una diana manejable para analizar los efectos de la activación génica endógena sobre el estado celular, la activación de vías y la remodelación transcriptómica aguas abajo.

Las partículas de activación lentiviral Peg10 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de PEG10 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Peg10 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción PEG10, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Peg10. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo PEG10 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.