Plasmide Double Nickase (h) PDGF Receptor beta/PDGFRB: sc-400187-NIC

PDGFRB code le récepteur bêta du facteur de croissance dérivé des plaquettes (platelet-derived growth factor receptor beta, PDGFRβ), une tyrosine kinase réceptrice qui se lie aux ligands PDGF afin de réguler la prolifération, la migration et la survie des péricytes et des cellules musculaires lisses vasculaires. La dimérisation induite par le ligand et l'autophosphorylation activent des voies de signalisation en aval via PI3K–AKT, RAS–MAPK, PLCγ et STAT, coordonnant le remodelage du cytosquelette, la dynamique de la matrice extracellulaire et le soutien angiogénique des réseaux endothéliaux. PDGFRB est un acteur central du dialogue stroma–vaisseaux au cours du développement et du remodelage tissulaire, et il est fréquemment étudié dans la fibrose, la biologie du microenvironnement tumoral et les pathologies vasculaires. Une signalisation PDGFRB altérée ainsi que des réarrangements ont été associés à des processus prolifératifs et néoplasiques, ce qui en fait un nœud clé pour analyser les dépendances de signalisation des récepteurs aux facteurs de croissance.

PDGF Receptor beta/PDGFRB Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PDGFRB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PDGFRB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PDGFRB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PDGFRB.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.