PAPP-A CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406222

개요

PAPPA는 임신 관련 혈장 단백질 A(PAPP-A)를 암호화하며, PAPP-A는 pappalysin 계열에 속하는 분비성 금속단백분해효소로서 IGF 결합 단백질(특히 IGFBP4 및 IGFBP5)을 절단함으로써 인슐린유사성장인자(IGF)의 생체이용가능성을 조절합니다. PAPP-A는 국소적으로 유리 IGF를 증가시켜 PI3K–AKT 및 MAPK/ERK와 같은 IGF1R 구동 신호전달 경로를 조절하며, 이는 조직 리모델링 맥락에서 세포 증식, 분화, 생존에 영향을 줍니다. 또한 PAPP-A 활성은 세포외기질 인접 영역에서의 단백질분해 및 혈관·기질 미세환경에서 성장인자 신호전달의 측분비(paracrine) 조절과도 연관되어 있습니다. PAPPA의 발현 또는 활성이 비정상적으로 조절되는 현상은 태반 생물학, 죽상경화성 플라크 생물학, 염증성 심대사(카디오메타볼릭) 표현형과 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 질환 관련 세포 유형에서 IGF 축 조절 기전을 규명하기 위한 연구의 필요성을 뒷받침합니다.

PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PAPPA 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PAPPA 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PAPPA의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PAPP-A 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PAPP-A 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PAPPA 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PAPP-A 기능에 중요한 PAPPA 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PAPPA 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PAPP-A CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PAPPA 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PAPP-A HDR 플라스미드 (h) 및 PAPP-A HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PAPPA 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PAPPA 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.