P2Y12 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-417999

개요

P2RY12는 퓨린성 수용체 P2Y12를 암호화하며, P2Y12는 Gi에 결합된 GPCR로서 세포외 ADP를 감지해 cAMP 신호를 억제하고, 하위 PI3K/AKT 및 인테그린 신호를 통해 혈소판의 활성화, 응집, 혈전 안정화를 조정합니다. 지혈 기능을 넘어 P2Y12는 항상성 미세아교세포의 대표적 표지자로 알려져 있으며, 뉴클레오타이드에 대한 반응으로 화학주성, 돌기 운동성, 신경면역 감시 기능을 조절합니다. P2RY12의 활성 또는 발현 변화는 비정상적인 혈소판 반응성과 연관되어 왔고, 신경염증 및 신경퇴행성 환경에서 관찰되는 미세아교세포 상태 변화와도 연결되어 있습니다. 이러한 특성으로 인해 P2RY12는 뉴클레오타이드 구동 신호전달, 세포–세포 간 소통, 면역–혈관 상호작용을 규명하는 데 유용한 표적입니다.

P2Y12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 P2RY12 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 P2RY12 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 P2RY12의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P2Y12 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P2Y12 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 P2RY12 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P2Y12 기능에 중요한 P2RY12 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 P2RY12 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P2Y12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 P2Y12 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 P2RY12 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P2Y12 HDR 플라스미드 (h) 및 P2Y12 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 P2RY12 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 P2RY12 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.