Oasl1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-433090

Übersicht

Oasl1 (2′-5′-Oligoadenylat-Synthetase-ähnlich 1) ist ein interferon-stimuliertes Gen der Maus, das an der Regulation der angeborenen Immunantwort während antiviraler Reaktionen beteiligt ist. Im Gegensatz zu katalytisch aktiven Mitgliedern der OAS-Familie wirkt Oasl1 vor allem über Protein-Protein- und RNA-assoziierte Interaktionen, die die Typ-I-Interferon-Signalübertragung und nachgeschaltete Transkriptionsprogramme modulieren. Es wird mit der Kontrolle von Interferon-regulatorischen Faktor-(IRF)-Signalwegen sowie mit breiteren Entzündungsschaltkreisen in Verbindung gebracht, die die Aktivierung von Immunzellen und die Zytokinproduktion prägen. Eine fehlregulierte Oasl1-Aktivität ist daher relevant für die Untersuchung von Mechanismen abweichender Interferonantworten und immunvermittelter Pathologien in Infektions- und Entzündungsmodellen.

Das Oasl1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Oasl1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Oasl1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Oasl1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Oasl1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Oasl1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Oasl1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Oasl1-Exone abzielen, die für die Oasl1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Oasl1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Oasl1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Oasl1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Oasl1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Oasl1 HDR-Plasmid (m) und Oasl1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Oasl1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Oasl1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.