Nurr1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400289-LAC

NR4A2 kodiert den orphan nukleären Rezeptor Nurr1, einen ligandenunabhängigen Transkriptionsfaktor, der Genprogramme reguliert, die die neuronale Differenzierung, die Aufrechterhaltung von Synapsen und den Entzündungsstatus steuern. Nurr1 moduliert die Transkription durch Interaktionen mit Koregulatoren und Response-Elementen und beeinflusst dabei Signalwege, die mit der Identität dopaminerger Neuronen, der mitochondrialen Homöostase und der Aktivierung von Mikroglia verknüpft sind. In der menschlichen Biologie wurden veränderte NR4A2-Expression oder -Aktivität mit krankheitsrelevanten Mechanismen neurodegenerativer und neuropsychiatrischer Erkrankungen in Verbindung gebracht, darunter dopaminerge Dysfunktion und Neuroinflammation. Diese Eigenschaften machen NR4A2/Nurr1 zu einem intensiv untersuchten Knotenpunkt in transkriptionellen Netzwerken, die zelluläre Stressreaktionen mit neuronalen und immunologischen Phänotypen koppeln.

Nurr1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente NR4A2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Nurr1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der NR4A2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Nurr1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen NR4A2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.