Plásmido Doble Nickase (h) Nup88: sc-404091-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Nup88 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Nup88 (h) y el plásmido de doble nickasa Nup88 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a NUP88. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Nup88 Anticuerpo (H-7): sc-365868
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Nup88 | sc-404091-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Nup88 | sc-404091-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NUP88 codifica Nup88, un componente central de la cara citoplasmática del complejo del poro nuclear que ayuda a organizar el transporte nucleocitoplasmático mediante interacciones con nucleoporinas como NUP214 y con receptores de transporte. Al regular el tráfico de ARNm y de proteínas, Nup88 influye en la progresión del ciclo celular, las respuestas al estrés y las salidas de señalización que dependen de una importación/exportación nuclear oportuna, incluidas vías vinculadas al control transcripcional. La alteración de la expresión o la función de NUP88 se ha asociado con un transporte nuclear desregulado y con la homeostasis celular en contextos de biología del cáncer y de enfermedades del desarrollo. Por ello, NUP88 se estudia con frecuencia en mecanismos que conectan la arquitectura del poro nuclear con la proteostasis y con programas de expresión génica.
Nup88 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus NUP88 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de NUP88. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de NUP88. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con NUP88 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.