Nup153 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403206

Descripción general

NUP153 codifica Nup153, una nucleoporina estructural del complejo del poro nuclear que contribuye a la arquitectura de la cesta nuclear y regula el transporte nucleocitoplasmático. Nup153 participa en el ensamblaje y desensamblaje del poro nuclear durante el ciclo celular, interactúa con las vías de importinas/exportinas y ayuda a coordinar la organización de la cromatina y la regulación transcripcional en la periferia nuclear. A través de estas funciones, Nup153 influye en el procesamiento de ARN y el mantenimiento del genoma al controlar el acceso al núcleo de factores reguladores. La alteración de la función de las nucleoporinas, incluida la disrupción del transporte asociado a NUP153 y de la dinámica de la envoltura nuclear, se ha relacionado con mecanismos relevantes para la biología tumoral y fenotipos del neurodesarrollo en estudios celulares y genéticos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Nup153 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen NUP153 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del NUP153 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de NUP153 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Nup153.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en NUP153 para la investigación de la señalización de Nup153, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de NUP153 críticos para la función de Nup153
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de NUP153 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Nup153 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Nup153 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus NUP153. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Nup153 (h) y el plásmido HDR Nup153 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología NUP153 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana NUP153 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.