neuroligin 2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402250

Übersicht

NLGN2 kodiert Neuroligin 2, ein postsynaptisches Zelladhäsionsmolekül, das an inhibitorischen Synapsen angereichert ist und dort präsynaptische Neurexine bindet, um die Synapsenbildung und -reifung zu organisieren. Neuroligin 2 dient als Gerüstprotein für die GABAerge postsynaptische Spezialisierung, indem es die Rezeptor-Clusterung, die synaptische Signalübertragung und die Organisation des Zytoskeletts koordiniert und so das Gleichgewicht zwischen Erregung und Hemmung sowie die Netzwerksynchronie beeinflusst. Durch seine Rolle in der Synaptogenese und synaptischen Plastizität ist NLGN2 mit Signalwegen verknüpft, die neuronale Konnektivität und inhibitorische Neurotransmission regulieren. Eine veränderte Funktion oder Expression von NLGN2 wurde mit neuroentwicklungsbedingten und neuropsychiatrischen Phänotypen in Zusammenhang gebracht, die mit einer gestörten Entwicklung inhibitorischer Schaltkreise einhergehen.

Das neuroligin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des NLGN2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des NLGN2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von NLGN2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die neuroligin 2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von NLGN2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der neuroligin 2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf NLGN2-Exone abzielen, die für die neuroligin 2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere NLGN2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom neuroligin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom neuroligin 2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des NLGN2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das neuroligin 2 HDR-Plasmid (h) und neuroligin 2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von NLGN2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten NLGN2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.