NDUFB5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410902-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NDUFB5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NDUFB5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NDUFB5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NDUFB5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NDUFB5 Anticorpo (F-2): sc-514245
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NDUFB5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410902-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NDUFB5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410902-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NDUFB5 codifica uma subunidade acessória do complexo I da cadeia respiratória mitocondrial (NADH:ubiquinona oxidoredutase), que contribui para a montagem correta do complexo e para a transferência de elétrons do NADH para a ubiquinona. Por meio de seu papel na fosforilação oxidativa, o NDUFB5 influencia a manutenção do potencial de membrana mitocondrial, a produção de ATP e o equilíbrio redox celular, com efeitos a jusante na homeostase de espécies reativas de oxigênio. Alterações na função do complexo I estão associadas a estresse bioenergético mitocondrial, reprogramação metabólica e vulnerabilidades em tecidos com alta demanda energética, tornando o NDUFB5 um ponto relevante para o estudo de disfunção mitocondrial. Pesquisas sobre NDUFB5 frequentemente se cruzam com vias que controlam a proteostase mitocondrial, a mitofagia e respostas de sinalização núcleo–mitocôndria à respiração comprometida.
NDUFB5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NDUFB5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NDUFB5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NDUFB5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NDUFB5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.