Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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myogenin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421806
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- myogenin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico myogenin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: myogenin Anticuerpo (5FD): sc-52903
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
myogenin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421806 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Myog codifica la miogenina, un factor de transcripción de tipo hélice-bucle-hélice básico (bHLH) que actúa aguas abajo de MYOD1 y MYF5 para impulsar la diferenciación terminal del músculo esquelético. La miogenina se une a motivos E-box y coordina programas transcripcionales que controlan la salida del ciclo celular de los mioblastos, la formación de miotubos y la activación de genes sarcoméricos y de estructura muscular. Funciona dentro de las redes regulatorias miogénicas centrales e interactúa con la remodelación de la cromatina y con entradas de señalización vinculadas a MAPK/PI3K que modulan el compromiso de linaje. La desregulación de los programas transcripcionales asociados a la miogenina es relevante para estudios sobre miogénesis alterada, regeneración muscular y mecanismos de enfermedades neuromusculares en sistemas modelo de ratón.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO myogenin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Myog en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Myog junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Myog tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína myogenin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Myog para la investigación de la señalización de myogenin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Myog críticos para la función de myogenin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Myog para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido myogenin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido myogenin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Myog. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR myogenin (m) y el plásmido HDR myogenin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Myog para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Myog definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.