Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Muskelin (h): sc-409182
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Muskelin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Muskelin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Muskelin Antibody (C-12): sc-398956
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Muskelin (h) | sc-409182 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
MKLN1 code la muskéline, une protéine d’échafaudage cytosolique et associée aux vésicules, impliquée dans le trafic intracellulaire, l’organisation du cytosquelette et la protéostasie. La muskéline participe au transport endosomal et à des processus liés à l’adhérence cellulaire, et a été associée à la régulation du renouvellement des récepteurs et des canaux ioniques via la coordination de complexes multiprotéiques. En influençant la dynamique dépendante des microtubules et la localisation subcellulaire de composants de signalisation, MKLN1 peut moduler des voies qui gouvernent la morphologie cellulaire, la migration et les réponses au stress. Des altérations de la fonction de MKLN1/de la muskéline ont été étudiées dans des contextes de neurobiologie et de phénotypes associés au cancer, ce qui soutient sa pertinence pour des investigations mécanistiques de la signalisation dépendante du trafic et de l’homéostasie cellulaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Muskelin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène MKLN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du MKLN1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert MKLN1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Muskelin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en MKLN1 pour l'étude de la signalisation de Muskelin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de MKLN1 essentiels à la fonction de Muskelin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de MKLN1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Muskelin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Muskelin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus MKLN1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Muskelin plasmide HDR (h) et le Muskelin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie MKLN1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles MKLN1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.