Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) MuRF1: sc-436648-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MuRF1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MuRF1 (m) y el plásmido de doble nickasa MuRF1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Trim63. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MuRF1 Anticuerpo (C-11): sc-398608
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MuRF1 | sc-436648-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MuRF1 | sc-436648-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Trim63 de ratón codifica MuRF1, una ligasa E3 de ubiquitina con dominio RING específica del músculo que regula la proteostasis al dirigir proteínas miofibrilares y sarcoméricas hacia una degradación dependiente de ubiquitina. MuRF1 actúa dentro del sistema ubiquitina–proteasoma y se integra con vías que controlan la remodelación muscular, la comunicación cruzada entre autofagia y proteasoma, y la señalización sensible al estrés que determina el tamaño de la fibra y la composición contráctil. La actividad alterada de Trim63/MuRF1 se estudia con frecuencia en contextos de atrofia del músculo esquelético y cardíaco, respuestas al desuso o a la denervación, desgaste asociado a caquexia y remodelado relacionado con cardiomiopatías. Como regulador nodal del catabolismo muscular, MuRF1 ofrece un punto de entrada genéticamente manejable para analizar programas transcripcionales y posraduccionales que gobiernan el mantenimiento de la masa muscular.
MuRF1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Trim63 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Trim63. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Trim63. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Trim63 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.