Morc3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404099

Descripción general

MORC3 (Morc3) codifica una ATPasa nuclear de la familia MORC que se asocia con la cromatina y contribuye a la regulación dependiente de ATP de la organización del genoma. Se ha implicado en el control transcripcional, el mantenimiento de estados de heterocromatina y los procesos de respuesta al daño del ADN mediante interacciones con complejos proteicos asociados a la cromatina. La actividad de MORC3 está vinculada a la regulación de la arquitectura nuclear y de programas génicos sensibles al estrés, lo que la hace relevante para estudios sobre la estabilidad epigenética y la señalización inmunitaria innata. Se han descrito la desregulación de la función de MORC3 y la reactividad de autoanticuerpos en contextos autoinmunes, lo que respalda la investigación de su papel en fenotipos celulares asociados a la inflamación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Morc3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MORC3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MORC3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MORC3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Morc3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MORC3 para la investigación de la señalización de Morc3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MORC3 críticos para la función de Morc3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MORC3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Morc3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Morc3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MORC3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Morc3 (h) y el plásmido HDR Morc3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MORC3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MORC3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.