Plásmido Doble Nickase (m) MOAP1: sc-425675-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MOAP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MOAP1 (m) y el plásmido de doble nickasa MOAP1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Moap1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MOAP1 Anticuerpo (E-8): sc-271467
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MOAP1 | sc-425675-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MOAP1 | sc-425675-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Moap1 codifica el modulador de la apoptosis 1 (MOAP1), una proteína asociada a las mitocondrias que promueve la señalización apoptótica intrínseca al facilitar la activación de BAX y la permeabilización de la membrana externa mitocondrial. En células de ratón, MOAP1 participa en programas de muerte celular inducidos por estrés y se interconecta con vías relacionadas con p53 y TNF que regulan la supervivencia, la integridad mitocondrial y la activación de caspasas. La actividad alterada de MOAP1 se ha estudiado en contextos en los que la apoptosis está desregulada, incluidos la biología tumoral y modelos de neurodegeneración. Por lo tanto, la perturbación de Moap1 es útil para investigar cómo los puntos de control mitocondriales determinan la homeostasis tisular y las respuestas al estrés.
MOAP1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Moap1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Moap1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Moap1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Moap1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.